V poslední době se zajímám o zdraví a léčbu v souvislosti s epidemií covid-19.

Studie (odborný článek o mRNA technologii): Horší než nemoc samotná

3. 12. 2021 18:08
Rubrika: Zdraví | Štítky: zdraví , COVID-19 , vakcíny , mRNA

Vydavatel: International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 

zdroj https://ijvtpr.com/index.php/IJVTPR/article/view/23/version/33

 

 

Název dokumentu a Autoři:

Worse Than the Disease? Reviewing Some Possible Unintended Consequences of the mRNA Vaccines Against COVID-19
Autoři: Stephanie Seneff1 and Greg Nigh2
1 Computer Science and Artificial Intelligence Laboratory, MIT, Cambridge MA, 02139, USA, E-mail: seneff@csail.mit.edu
2 Naturopathic Oncology, Immersion Health, Portland, OR 97214, USA

 

PŘEKLAD GOOGLE - cílem tohoto překladu není nahradit originál. Pokud vás zaujme nějaký text, najděte si originální znění. PŘEKLAD ZAČÍNÁ v druhé polovině NA  STR. 5.

 

Technologie mRNA vakcín

V rané fázi vývoje genové terapie založené na nukleotidech bylo mnohem více úsilí investováno do dodávání genů prostřednictvím DNA plasmidů spíše než prostřednictvím technologie mRNA. Dvě hlavní překážky pro mRNA jsou její přechodná povaha kvůli její náchylnosti k rozpadu RNAázami, stejně jako její známá schopnost vyvolat silnou imunitní odpověď, která interferuje s její transkripcí do proteinu. Bylo prokázáno, že plazmidová DNA přetrvává ve svalu až šest měsíců, zatímco mRNA téměř jistě zmizí mnohem dříve. Pro aplikace vakcín se původně předpokládalo, že imunogenní povaha RNA by mohla být výhodná, protože mRNA by mohla fungovat jako adjuvans pro vakcínu, čímž by se eliminovaly argumenty ve prospěch toxického aditiva, jako je hliník. Imunitní reakce však nevede pouze k zánětlivé reakci, ale také k rychlému odstranění RNA a potlačení transkripce. Tento nápad se tedy ukázal jako nepraktický.

 

Existovalo rozsáhlé časové období, během kterého byly zkoumány různé nápady, jak zabránit rozpadu mRNA dříve, než by mohla produkovat protein. Hlavním pokrokem bylo zjištění, že nahrazení všech uridinových nukleotidů methyl-pseudouridinem by stabilizovalo RNA proti degradaci, což by jí umožnilo přežít dostatečně dlouho, aby produkovala adekvátní množství proteinového antigenu 

 

( International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 393)

 

potřebného pro imunogenezi (Liu, 2019). Tato forma mRNA dodávaná ve vakcíně se v přírodě nikdy nevyskytuje, a proto má potenciál pro neznámé důsledky.

mRNA vakcíny Pfizer-BioNTech a Moderna jsou založeny na velmi podobných technologiích, kde lipidová nanočástice obklopuje sekvenci RNA kódující spike protein SARS-CoV-2 v plné délce. Ve výrobním procesu je prvním krokem sestavení molekuly DNA kódující spike protein. Tento proces byl nyní komoditizován, takže je relativně jednoduché získat molekulu DNA ze specifikace sekvence nukleotidů (Corbett et al., 2020). Po bezbuněčné in vitro transkripci z DNA, využívající enzymatické reakce katalyzované RNA polymerázou, je jednovláknová RNA stabilizována prostřednictvím specifických nukleosidových modifikací a vysoce purifikována.

Společnost Moderna, Cambridge, MA, je jedním z vývojářů nasazených mRNA vakcín pro SARS-CoV-2. Vedení společnosti Moderna má velkou vizi rozšíření technologie pro mnoho aplikací, kde může být tělo nasměrováno k produkci terapeutických proteinů nejen pro produkci protilátek, ale mimo jiné také k léčbě genetických onemocnění a rakoviny. Vyvíjejí generickou platformu, kde DNA je úložný prvek, messenger RNA je „software“ a proteiny, které RNA kóduje, představují různé aplikační domény. Vize je grandiózní a teoretický potenciál aplikací je obrovský (Moderna, 2020). Technologie je působivá, ale manipulace s kódem života by mohla vést ke zcela neočekávaným negativním účinkům, potenciálně dlouhodobým nebo dokonce trvalým.

SARS-CoV-2 je členem třídy RNA virů s pozitivním vláknem, což znamená, že kódují přímo proteiny, které RNA kóduje, namísto toho, aby před translací do proteinu vyžadovaly kopii do antisense vlákna. Virus sestává primárně z jednovláknové molekuly RNA sbalené uvnitř proteinového obalu, který se skládá ze strukturálních proteinů viru, zejména spike proteinu, který usnadňuje vazbu viru na receptor (v případě SARS-CoV-2 to je ACE2 receptor) a virová fúze s membránou hostitelské buňky. Protein spike SARS-CoV-2 je primárním cílem pro neutralizaci protilátek. Je to fúzní glykoprotein třídy I a je analogický hemaglutininu produkovanému chřipkovými viry a fúznímu glykoproteinu produkovanému syncytiálními viry, stejně jako gp160 produkovanému virem lidské imunodeficience (HIV) (Corbett et al., 2020).

mRNA vakcíny jsou vyvrcholením let výzkumu při zkoumání možnosti použití RNA zapouzdřené v lipidové částici jako posla. Stávající biologický aparát hostitelské buňky je kooptován pro usnadnění přirozené produkce proteinu z mRNA. Toto pole rozkvetlo částečně kvůli snadnosti, s jakou mohou být specifické sekvence oligonukleotidové DNA syntetizovány v laboratoři bez přímého zapojení živých organismů. Tato technologie se stala komoditou a lze ji provádět ve velkém měřítku s relativně nízkými náklady. Enzymatická konverze DNA na RNA je také přímočará a je možné izolovat v podstatě čistou jednovláknovou RNA z reakční polévky (Kosuri a Church, 2014).

 

1. Úvahy o selekci a modifikaci mRNA

 

Zatímco proces je v principu jednoduchý, výrobci mRNA vakcín čelí některým značným technickým problémům. První, jak jsme diskutovali, je, že samotná extracelulární mRNA může vyvolat imunitní odpověď, která by vedla k její rychlé clearance ještě předtím, než je vůbec absorbována

 

(International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2(1), 10. května 2021 Strana | 394)

 

buňky. Takže mRNA musí být uzavřena v nanočástici, která ji udrží skrytou před imunitním systémem. Druhým problémem je přimět buňky, aby přijaly nanočástice. To lze částečně vyřešit začleněním fosfolipidů do nanočástice, aby se využily přirozené cesty endocytózy lipidových částic. Třetím problémem je aktivace mechanismu, který se podílí na překládání RNA na protein. V případě SARS-CoV-2 je produkovaným proteinem spike protein. Po syntéze spike proteinu musí buňky prezentující antigen prezentovat spike protein T lymfocytům, které nakonec produkují ochranné paměťové protilátky (Moderna, 2020). Tento krok není příliš přímočarý, protože nanočástice jsou většinou pohlceny svalovými buňkami, které, protože jsou nepohyblivé, nejsou nezbytně vybaveny ke spuštění imunitní reakce. Jak uvidíme, pravděpodobný scénář je, že spike protein je syntetizován svalovými buňkami a poté předán makrofágům působícím jako buňky prezentující antigen, které pak spustí standardní kaskádovou reakci generující protilátky na bázi B-buněk.

mRNA, která je uzavřena ve vakcínách, prochází po syntéze z templátu DNA několika modifikačními kroky. Některé z těchto kroků zahrnují její přípravu tak, aby vypadala přesně jako lidská sekvence mRNA vhodně modifikovaná pro podporu ribozomální translace na protein. Další modifikace mají za cíl chránit jej před rozpadem, aby bylo možné produkovat dostatek proteinu k vyvolání protilátkové odpovědi. Nemodifikovaná mRNA indukuje imunitní odpověď, která vede k vysokým hladinám interferonu-α v séru (IF-α), což je považováno za nežádoucí odpověď. Vědci však zjistili, že nahrazení všech uridinů v mRNA N-methyl-pseudouridinem zvyšuje stabilitu molekuly a zároveň snižuje její imunogenicitu (Karikó et al. 2008; Corbett et al., 2020). Tento krok je součástí přípravy mRNA ve vakcínách, ale navíc se na 5' konec molekuly přidá 7-methylguanosinová „čepička“ a polyadeninový (poly-A) konec, sestávající z 100 nebo více adeninových nukleotidů, je přidáno na 3' konec. Čepice a ocas jsou nezbytné pro udržení stability mRNA v cytosolu a podporu translace na protein (Schlake et al., 2012; Gallie, 1991).

Normálně se spike protein velmi snadno překlopí z konfigurace před fúzí do konfigurace po fúzi. Špičkový protein, který je v těchto vakcínách, byl upraven tak, aby podporoval stabilní konfiguraci ve stavu předfúze, protože tento stav vyvolává silnější imunitní odpověď (Jackson et al., 2020). To bylo provedeno prostřednictvím „genetické mutace“ nahrazením kritického dvouzbytkového segmentu dvěma prolinovými zbytky v pozicích 986 a 987, v horní části centrální šroubovice podjednotky S2 (Wrapp et al., 2020). Prolin je vysoce neflexibilní aminokyselina, takže narušuje přechod do fúzního stavu. Tato modifikace poskytuje protilátkám mnohem lepší přístup ke kritickému místu, které podporuje fúzi a následný buněčný příjem. Může to ale také znamenat, že geneticky modifikovaná verze spike proteinu produkovaného lidskou hostitelskou buňkou podle instrukcí z vakcínové mRNA přetrvává v plazmatické membráně navázané na ACE2 receptory kvůli narušeným fúzním schopnostem? Co to může mít za následek? Nevíme.

Vědci v Číně publikovali zprávu v Nature v srpnu 2020, ve které prezentovali údaje o několika experimentálních mRNA vakcínách, kde mRNA kódovala různé fragmenty a proteiny ve viru SARS-CoV-2. Testovali tři různé formulace vakcín na jejich schopnost vyvolat vhodnou imunitní odpověď u myší. Tři strukturní proteiny, S (spike), M a E, jsou minimální požadavky na sestavení „viru podobné částice“ (VLP). Jejich hypotéza byla, že poskytnutí M a E stejně jako S spike protein v kódu mRNA by umožnilo sestavení VLP, 

 

( International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 395)

 

které by mohly vyvolat zlepšenou imunitní odpověď, protože se více podobají přirozenému viru než S protein vystavený na povrchu buněk, které přijaly pouze mRNA proteinu S z nanočástic vakcíny. Také doufali, že kritické fragmenty spike proteinu by byly dostatečné k navození imunity, spíše než celý spike protein, pokud by bylo možné produkovat virové částice pomocí augmentace s M a E (Lu et al., 2020).

Experimentálně potvrdili, že vakcína obsahující kompletní geny pro všechny tři proteiny vyvolala silnou imunitní odpověď, která trvala nejméně osm týdnů po druhé dávce vakcíny. Jeho účinnost byla mnohem lepší než u vakcíny obsahující pouze spike protein. Je zklamáním, že vakcína, která obsahovala pouze kritické složky spike proteinu, doplněná o další dva obalové proteiny, nevyvolala prakticky žádnou odpověď.

Výzkumníci z Moderny provedli podobné studie s podobnými výsledky. Došli k závěru, že samotný spike protein je jasně horší než formulace obsahující RNA kódující všechny tři obalové proteiny, a předpokládali, že to bylo způsobeno skutečností, že všechny tři proteiny byly potřeba k tomu, aby buňka mohla uvolnit neporušené částice podobné viru. než jen vystavit vrcholový protein v plazmatické membráně. Samotný spike protein nedokázal iniciovat T buněčnou odpověď ve studiích na zvířatech, zatímco formulace se všemi třemi proteiny ano (Corbett et al., 2020).

Dvě nouzově schválené vakcíny obsahují pouze mRNA kód pro spike protein (bez E nebo M) a pro toto rozhodnutí musel být dobrý důvod, navzdory pozorovanému špatnému výkonu. Je možné, že sofistikovanější design lipidových nanočástic (viz níže) vedl ke schopnosti nechat lipidy sloužit jako adjuvans (podobně jako hliník, který se běžně přidává do tradičních vakcín), a přitom stále chránit RNA před degradací.

Další kuriózní modifikací v RNA kódu je, že vývojáři obohatili sekvenci o cytosiny a guaniny (Cs a Gs) na úkor adeninů a uracilu (As a Us). Dávali pozor, aby tímto způsobem nahradili pouze třetí pozici v kodonu a pouze tehdy, když to nezmění mapu aminokyselin (Hubert, 2020). Experimentálně bylo prokázáno, že sekvence mRNA bohaté na GC jsou exprimovány (přeloženy do proteinu) až 100krát účinněji než sekvence chudé na GC (Kudla et al., 2006). Zdá se tedy, že se jedná o další modifikaci pro další zajištění syntézy hojných kopií spike proteinu. Neznáme nezamýšlené důsledky tohoto manévru. Intracelulární patogeny, včetně virů, mívají ve srovnání s genomem hostitelské buňky nízký obsah GC (Rocha a Danchin, 2020). Takže tato modifikace mohla být částečně motivována touhou zvýšit účinnost klamu, že protein je lidský protein.

Všechny tyto různé modifikace RNA jsou navrženy tak, aby odolávala rozpadu, vypadala spíše jako sekvence kódující protein lidské messenger RNA a účinně se převáděla na antigenní protein.

 

2. Konstrukce lipidových nanočástic

 

Lipidové nanočástice (LNP), také známé jako lipozomy, mohou zapouzdřit molekuly RNA a chránit je před enzymatickou degradací ribonukleázami, a tak tvoří základní složku úspěšného způsobu dodávání (Wadhwa et al., 2020; Xu et al., 2020 ). Tyto umělé konstrukty se velmi podobají exosomům (váček, pozn. překladu). Exozomy jsou extracelulární vezikuly vylučované buňkami a vychytávané

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2(1), 10. května 2021 Strana | 396

 

jejich sousedy a také často obsahují DNA nebo RNA. Tyto nanočástice tedy mohou využívat přirozené procesy endocytózy, které za normálních okolností internalizují extracelulární exozomy do endozomů. Když se endozom okyselí, aby se stal lysozomem, mRNA se uvolňuje do cytoplazmy a zde dochází k translaci na protein. Ve skutečnosti bylo zjištěno, že lipozomy jsou úspěšnější při zlepšování prezentace antigenu a zrání dendritických buněk ve srovnání s fúzními proteiny, které zapouzdřují vakcíny na bázi virů (Norling et al., 2019).

Lipidové nanočástice (LNP) v těchto vakcínách jsou složeny z ionizovatelných kationtových lipidů, fosfolipidů, cholesterolu a polyethylenglykolu (PEG). Společně se tato směs sestaví do stabilní lipidové dvojvrstvy kolem molekuly mRNA. Fosfolipidy v těchto experimentálních vakcínách se skládají z fosfatidylcholinové hlavní skupiny spojené se dvěma nasycenými alkylovými konci přes glycerolový linker. Lipid používaný v těchto vakcínách, pojmenovaný 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-fosfocholin (DSPC), má 18 opakujících se uhlíkových jednotek. Relativně dlouhý řetězec má tendenci tvořit gelovou fázi spíše než tekutou fázi. Molekuly s kratšími řetězci (jako je 12-uhlíkový řetězec) mají tendenci zůstávat v kapalné fázi. Bylo zjištěno, že lipozomy v gelové fázi využívající DSPC mají vynikající účinnost při ochraně RNA před degradací, protože delší alkylové řetězce jsou mnohem více omezeny ve svém pohybu v lipidové doméně. Zdá se také, že jsou účinnější jako adjuvans, zvyšují uvolňování cytokinů tumor nekrotizujícího faktoru-α (TNF-α), interleukinu (IL)-6 a IL-1β z exponovaných buněk (Norling et al., 2019). Jejich schopnost vyvolat zánětlivou reakci však může být příčinou mnoha symptomů, které lidé zažívají, jako je bolest, otok, horečka a ospalost. Studie publikovaná v bioRxiv experimentálně ověřila, že tyto ionizovatelné kationtové lipidy v lipidových nanočásticích vyvolávají silnou zánětlivou reakci u myší (Ndeupen et al., 2021).

Současné mRNA vakcíny jsou dodávány intramuskulární injekcí. Svaly obsahují velkou síť krevních cév, kde mohou být imunitní buňky rekrutovány do místa vpichu (Zeng et al., 2020). Svalové buňky obecně mohou posílit imunitní reakci, jakmile imunitní buňky infiltrují, v reakci na adjuvans (Marino et al., 2011). Pečlivá analýza odpovědi na mRNA vakcínu podanou myším odhalila, že antigen je exprimován nejprve ve svalových buňkách a poté přenesen do buněk prezentujících antigen, což naznačuje „cross-priming“ jako primární cestu pro zahájení CD8 T buněčné odpovědi ( Lazzaro a kol., 2015). Dá se spekulovat o tom, že svalové buňky využívají imunitní odpověď, která se normálně používá k řešení špatně poskládaných lidských proteinů. Takové proteiny indukují upregulaci proteinů hlavního histokompatibilního komplexu (MHC) třídy II, které se pak vážou na špatně složené proteiny a transportují je neporušené do plazmatické membrány (Jiang et al., 2013).

Povrchový protein navázaný na MHC pak indukuje zánětlivou odpověď a následnou infiltraci buněk prezentujících antigen (např. dendritických buněk a makrofágů) do svalové tkáně, které pak vychytají zobrazené proteiny a přenesou je do lymfatického systému, aby je prezentovaly T buňky. Tyto T buňky pak mohou konečně spustit kaskádu, která nakonec produkuje paměťové protilátky specifické pro protein. Svalové buňky exprimují proteiny MHC třídy II (Cifuentes-Diaz et al., 1992). Na rozdíl od třídy I se proteiny MHC třídy II specializují na transport intaktních proteinů na povrch, na rozdíl od malých peptidových sekvencí odvozených z částečného rozpadu proteinů (Jiang et al., 2013).

Studie in vitro na nehumánních primátech prokázala, že radioaktivně značená mRNA se přesunula z místa vpichu do drenážní lymfatické uzliny a zůstala tam alespoň 28 hodin. Antigen

 

 

( International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 397)

 

Bylo prokázáno, že prezentující buňky (APC) ve svalové tkáni i v drenážních lymfatických uzlinách obsahují radioaktivně značenou mRNA (Lindsay et al., 2019). Klasické APC zahrnují dendritické buňky, makrofágy, Langerhansovy buňky (v kůži) a B buňky. Mnoho vedlejších účinků spojených s těmito vakcínami zahrnuje bolest a zánět v místě vpichu, jak by se dalo očekávat vzhledem k rychlé infiltraci imunitních buněk.

Lymfadenopatie je zánětlivý stav v lymfatickém systému spojený se zduřením lymfatických uzlin. Zduření lymfatických uzlin v podpaží (axilární lymfadenopatie) je znakem metastatického karcinomu prsu. Práce publikovaná v roce 2021 popsala čtyři případy žen, u kterých se vyvinula axilární lymfadenopatie po vakcíně proti SARS-CoV-2 (Mehta et al., 2021). Autoři naléhali na opatrnost při nesprávné interpretaci tohoto stavu jako indikátoru vyžadujícího sledování biopsie pro možnou rakovinu prsu. Tento příznak potvrzuje sledovací studie, které ukazují, že mRNA vakcína je převážně přijímána APC, které pak pravděpodobně syntetizují antigen (spike protein) z mRNA a migrují do lymfatického systému, přičemž na svých membránách zobrazují spike protein.

Seznam nejčastějších nežádoucích účinků hlášených FDA, které byly zaznamenány během klinických studií Pfizer-BioNTech, zahrnuje „bolest v místě vpichu, únava, bolest hlavy, bolest svalů, zimnice, bolest kloubů, horečka, otok v místě vpichu, zarudnutí v místě vpichu, nevolnost, malátnost a lymfadenopatie." (US Food and Drug Administration, 2021).

Nyní se zaměříme na jednotlivé molekulární a orgánové systémy, které vyvstávají s těmito mRNA vakcínami.

Adjuvans, polyethylenglykol a anafylaxe

Adjuvancia jsou přísady do vakcín, které mají „vyvolat výrazné imunologické profily s ohledem na směr, trvání a sílu imunitních odpovědí“ z vakcín, do kterých jsou přidány (Liang et al., 2020). Kamenec nebo jiné sloučeniny hliníku se nejčastěji používají v tradičních vakcínách a vyvolávají širokou škálu cest systémové imunitní aktivace a také aktivaci stromálních buněk v místě injekce (Lambrecht et al., 2009; Danielsson & Eriksson, 2021). .

Bylo zjištěno, že adjuvans na bázi hliníku není pro vakcínu proti koronaviru optimální, a tak se hledala jiná řešení (Liang et. al., 2020). Řešení se prezentovalo ve formě široce používané farmaceutické přísady polyethylenglykolu neboli PEG. Limitujícím faktorem při použití vakcín na bázi nukleových kyselin je tendence k rychlé degradaci nukleových kyselin nukleázovými enzymy (Ho et al., 2021). Pokud jde o enzymy RNázy zacílené na injikovanou mRNA, tyto enzymy jsou široce distribuovány jak intracelulárně (primárně v lysozomech) (Fujiwara et al., 2017), tak extracelulárně (Lu et al., 2018). K překonání tohoto omezení využívají obě mRNA vakcíny, které jsou v současnosti nasazeny proti COVID-19, nanočástice na bázi lipidů jako nosiče. Náklad mRNA je umístěn uvnitř obalu složeného ze syntetických lipidů a cholesterolu spolu s PEG, aby se molekula mRNA stabilizovala proti degradaci.

Vakcína vyráběná společností Pfizer/BioNTech vytváří nanočástice z 2-[(polyethylenglykol)-2000]-N,N-ditetradecylacetamidu nebo ALC-0159, běžně označovaného jednoduše jako PEG (Světová zdravotnická organizace, 2021, 14. ledna). Vakcína Moderna obsahuje další variantu PEG, SM-102, 1,2-dimyristoyl-rac-glycero-3-methoxypolyethylenglykol2000 (Světová zdravotnická organizace,

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 398

 

2021, 19. ledna). Pro usnadnění budeme oba PEG-modifikované lipidy zkracovat jako PEG a označovat vakcíny jako PEGylované podle standardní nomenklatury.

Lipidový obal hraje trojí roli. Za prvé, chrání genetický materiál před degradací před buněčným příjmem. Za druhé, lipidový obal, který také obsahuje cholesterol, usnadňuje buněčný příjem fúzí s lipidovou membránou buňky a následnou endocytózou lipidové částice, což vyvolává přirozeně existující procesy. A konečně působí jako adjuvans (Ho et al., 2021). Právě v této posledně uvedené roli imunitního stimulantu bylo vzneseno nejvíce obav ohledně rozšířeného použití PEG v injekční terapii.

V článku publikovaném v květnu 2019, před velkými klinickými studiemi zahrnujícími tyto PEGylované vakcíny, Mohamed et. al. (2019) popsali řadu zajímavých zjištění týkajících se PEG a imunologické aktivace, kterou produkoval, což zahrnuje humorální, buněčně zprostředkovanou aktivaci a aktivaci založenou na komplementu. Poznamenávají, že paradoxně velké injekční dávky PEG nevyvolávají zjevnou alergickou reakci. Malé dávky však mohou vést k dramatické patologické aktivaci imunitního systému. Vakcíny využívající PEGylaci využívají mikromolární množství těchto lipidů, což představuje tuto potenciálně imunogenní expozici nízkým dávkám.

Ve studiích na zvířatech se ukázalo, že aktivace komplementu je zodpovědná jak za anafylaxi, tak za kardiovaskulární kolaps, a injikovaný PEG aktivuje mnohočetné dráhy komplementu také u lidí. Autoři jedné studie uzavírají konstatování, že „Tato kaskáda sekundárních mediátorů podstatně zesiluje efektorové imunitní reakce a může u citlivých jedinců vyvolat anafylaxi. Nedávné studie na prasatech skutečně prokázaly, že systémová aktivace komplementu (např. indukovaná po intravenózní injekci PEGylovaných lipozomů) může být základem srdeční anafylaxe, kde C5a hrál kauzální roli. (Hamad et al., 2008) Je také důležité poznamenat, že k anafylaktoidnímu šoku u prasat nedošlo při první injekční expozici, ale po druhé injekční expozici (Kozma a kol., 2019).

Přítomnost protilátek proti PEG je v populaci rozšířená (Zhou et al., 2020). Yang a Lai (2015) zjistili, že přibližně 42 % zkoumaných vzorků krve obsahovalo protilátky proti PEG, a varují, že by to mohlo mít důležité důsledky pro jakákoli zavedená terapeutika na bázi PEG. Hong et. al. (2020) nalezli anti-PEG protilátky s prevalencí až 72 % v populacích bez předchozí expozice lékařské terapii na bázi PEG. Lila et. al. (2018) poznamenávají, že „existence takových anti-PEG protilátek úzce souvisí se zhoršením terapeutické účinnosti v tandemu s rozvojem závažných nežádoucích účinků v několika klinických nastaveních využívajících terapeutika na bázi PEGylovaných“.

Dříve se předpokládalo, že anafylaxe na vakcíny je vzácná na základě frekvence takových příhod hlášených VAERS, databázi zřízené Centers for Disease Control and Prevention v roce 1990 pro hlášení nežádoucích příhod souvisejících s vakcínami (Centers for Disease Control and Prevention, Centers for Disease Control and Prevention, 1990; Su et al., 2019). I když je anafylaxe vzácná, může být život ohrožující, takže je důležité monitorovat možnost v krátkém období po očkování (McNeil et al., 2016).

Sellaturay et. al., po přezkoumání 5 případů anafylaxe, které spojují s expozicí PEG, jeden téměř smrtelný a zahrnující srdeční zástavu, píší: „PEG je vysoce rizikový ‚skrytý‘ alergen, obvykle nepodezřelý a může způsobit časté alergické reakce v důsledku neúmyslného opakování. -vystavení. Alergické vyšetření s sebou nese riziko

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 399

 

anafylaxe a měla by být prováděna pouze ve specializovaných centrech pro alergii na léky. (Sellaturay et al., 2020). Ve skutečnosti již bylo prokázáno, že již existující protilátky proti PEG jsou spojeny s častějšími a závažnějšími reakcemi po opětovné expozici (Ganson et al., 2016).

Probíhá anafylaxe po expozici PEG s frekvencí relevantní pro veřejné zdraví? Tento fenomén nyní dokumentuje řada studií (Lee et al., 2015; Povsic et al., 2016; Wylon et al., 2016). Anafylaktické reakce na mRNA vakcíny jsou široce hlášeny v médiích (Kelso, 2021) a jak je uvedeno výše, byly často hlášeny v databázi VAERS (690 zpráv o anafylaxi po vakcínách proti SARS-CoV-2 do 29. ledna 2021) . V recenzované literatuře jsou také zveřejněny některé počáteční případové studie (Garvey & Nasser, 2020; tým CDC COVID-19 Response Team, 2021, 15. ledna). Anafylaktické reakce na vakcíny před těmito vakcínami COVID-19 byly obecně hlášeny v míře nižší než 2 případy na milion očkování (McNeil et al., 2016), zatímco současná míra očkování proti COVID-19 byla podle CDC vyšší. než 11 případů na milion (CDC COVID-19 Response Team, 2021, 29. ledna). Publikovaná prospektivní studie na 64 900 zdravotnických zaměstnancích, kde byly pečlivě sledovány jejich reakce na jejich první očkování mRNA, však zjistila, že 2,1 % subjektů hlásilo akutní alergické reakce. Extrémnější reakce zahrnující anafylaxi se objevila v poměru 247 na milion očkování (Blumenthal et al., 2021). To je více než 21krát více, než původně uvádělo CDC. Druhá injekční expozice pravděpodobně způsobí ještě větší počet anafylaktických reakcí.

 

mRNA vakcíny, spike proteiny a zesílení závislé na protilátkách (ADE)

 

ADE je imunologický fenomén poprvé popsaný v roce 1964 (Hawkes et al., 1964). V této publikaci Hawkes popsal sadu experimentů, ve kterých byly kultury flaviviru inkubovány s ptačím sérem obsahujícím vysoké titry protilátek proti těmto virům. Neočekávaným zjištěním bylo, že se stále vyšším ředěním séra obsahujícího protilátku se zvýšila infekčnost buněk. Neexistence vysvětlení, jak by se to mohlo stát, je pravděpodobně zodpovědné za to, že byl téměř 20 let z velké části ignorován (Morens et al., 1994).

Bylo navrženo několik cest, kterými se protilátky přímo i nepřímo podílejí na neutralizaci infekcí (Lu et al., 2018b). ADE je zvláštní případ toho, co se může stát, když jsou v době infekce přítomny nízké, neneutralizující hladiny specifických nebo zkříženě reaktivních protilátek proti viru. Tyto protilátky mohou být přítomny v důsledku předchozí expozice viru, expozice příbuznému viru nebo v důsledku předchozího očkování proti viru. Po reinfekci se protilátky v nedostatečném počtu k neutralizaci viru přesto vážou na virus. Tyto protilátky se poté ukotví na Fc receptoru na buněčných površích, usnadní vstup viru do buňky a následně zvýší infekčnost viru (Wan et. al., 2020).

Předpokládá se, že ADE je základem závažnější horečky dengue často pozorované u osob s předchozí expozicí (Beltramello et al., 2010) a může také hrát roli v závažnějším onemocnění u těch, kteří byli dříve proti této nemoci očkovaní (Shukla et al., 2020 ). Předpokládá se také, že ADE hraje roli u Ebola (Takada et al., 2003), infekce virem zika (Bardina et al., 2017) a dalších flavivirových infekcí (Campos et al., 2020).

 

V rozšířené korespondenci publikované v Nature Biotechnology, Eroshenko et. al. nabídnout komplexní přehled důkazů naznačujících, že ADE by se mohla projevit jakýmkoliv očkováním proti SARS-CoV-2. Důležité je, že poznamenávají, že ADE byla pozorována u vakcín proti koronaviru testovaných v modelech in vitro i in vivo (Eroshenko et al., 2020). Jiní varovali před stejnou možností u vakcín proti SARS-CoV-2. Teorie, jak by se ADE mohla objevit v případě vakcíny proti SARS-CoV-2, naznačuje, že neneutralizující protilátky tvoří imunitní komplexy s virovými antigeny, aby vyvolaly nadměrnou sekreci prozánětlivých cytokinů a v extrémním případě cytokinovou smršť. způsobující rozsáhlé lokální poškození tkáně (Lee et al., 2020). Jeden rozsáhlý přehled ADE potenciálně spojený s vakcínami SARS-CoV-2 poznamenal: „V současné době nejsou známy žádné klinické nálezy, imunologické testy nebo biomarkery, které by mohly odlišit jakoukoli závažnou virovou infekci od onemocnění se zesílenou imunitou, ať už měřením protilátek, T buňky nebo vnitřní reakce hostitele“ (Arvin et al. 2020; Liu et al., 2019). K tomuto bodu se ještě vrátíme níže.

Preexistující protilátky proti imunoglobulinu G (IgG), indukované předchozí vakcinací, přispívají k vážnému poškození plic SARS-CoV u makaků (Liu et al., 2019). Peron a Nakaya (2020) poskytují důkazy naznačující, že mnohem rozmanitější rozsah předchozích expozic koronavirům, se kterými se setkali starší lidé, je může predisponovat k ADE po expozici SARS-CoV-2. V předtištěném článku se uvádí, že plazma od 76 % pacientů, kteří se zotavili z těžkého onemocnění COVID-19, když byla přidána do kultur SARS-CoV-2 a citlivých buněk, vykazovala zvýšenou schopnost virové infekce SARS-CoV-2. Raji buňky (Wu et al., 2020). Autoři poznamenávají, že „titry protilátek [proti spike proteinu] byly vyšší u starších pacientů s COVID-19 a silnější protilátková odpověď byla spojena se zpožděním virové clearance a zvýšenou závažností onemocnění u pacientů. Proto je rozumné spekulovat, že protilátky specifické pro S protein mohou přispívat k závažnosti onemocnění během infekce SARS-CoV-2. (Wu a kol., 2020)

Bylo hlášeno, že všichni tři američtí výrobci vakcín – Moderna, Pfizer a Johnson & Johnson – pracují na vývoji přeočkování (Zaman 2021). existuje u této mladší populace možnost spuštění ADE související buď s budoucí infekcí SARS-CoV-2, nebo posilovací injekcí. Čas ukáže.

mRNA vakcíny nakonec dodávají vysoce antigenní spike protein do buněk prezentujících antigen. Jako takové jsou monoklonální protilátky proti spike proteinu očekávaným výsledkem aktuálně používaných mRNA vakcín. Bylo zjištěno, že monoklonální protilátky proti lidskému spike proteinu produkují vysoké hladiny zkříženě reaktivních protilátek proti endogenním lidským proteinům (Vojdani et. al., 2021; podrobněji přezkoumáno níže). Vzhledem k tomu, že důkazy zde byly přezkoumány pouze částečně, existuje dostatečný důvod k podezření, že protilátky proti spike proteinu budou přispívat k ADE vyvolané předchozí infekcí SARS-CoV-2 nebo očkováním, které se může projevit buď jako akutní nebo chronické autoimunitní a zánětlivé stavy. Výše jsme poznamenali, že není možné odlišit manifestaci onemocnění ADE od skutečné virové infekce jiné než ADE. V tomto světle je důležité si uvědomit, že když dojde k onemocněním a úmrtím krátce po vakcinaci mRNA vakcínou, nelze nikdy s konečnou platností určit, ani s úplným vyšetřením, že reakce na vakcínu nebyla proximální příčinou.

 

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 401

 

Patogenní priming, multisystémové zánětlivé onemocnění a autoimunita

Patogenní priming je koncept, který je podobný ve výsledku jako ADE, ale liší se v základním mechanismu. Diskutujeme o tom jako o jedinečném mechanismu, jehož prostřednictvím by mRNA vakcíny mohly vyvolat související patologie.

V dubnu 2020 byl publikován důležitý dokument týkající se potenciálu samovolně reagujících protilátek, které mají být generovány po expozici spike proteinu a dalším antigenním epitopům rozšířeným po délce SARS-CoV-2. Lyons-Weiler (2020) vytvořil frázi „priming patogenů“, protože věřil, že běžněji používané „posílení imunity“ nedokáže zachytit závažnost stavu a jeho důsledky. Ve své analýze in silico Lyons-Weiler porovnal všechny antigenní epitopy proteinu SARS-CoV-2 označené v databázi SVMTriP (http://sysbio.unl.edu/SVMTriP/) a prohledal databázi p-BLAST (https:// blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) pro homologii mezi těmito epitopy a endogenními lidskými proteiny. Z 37 analyzovaných proteinů SARS-CoV-2 mělo 29 antigenní oblasti. Všechny z těchto 29 kromě jednoho měly homologii s lidskými proteiny (předpokládané vlastní antigeny) a bylo předpovězeno, že jsou autoreaktogenní. Největší počet homologií byl spojen s spike (S) proteinem a NS3 proteinem, přičemž oba měly 6 homologních lidských proteinů.

Funkční analýza endogenních lidských proteinů homologních s virovými proteiny zjistila, že více než 1/3 z nich je spojeno s adaptivním imunitním systémem. Autor spekuluje, že předchozí expozice viru nebo předchozí vakcinace, které by mohly iniciovat produkci protilátek, které se zaměřují na tyto endogenní proteiny, mohou hrát roli ve vývoji závažnějších onemocnění, zejména u starších osob. V tomto případě již existující protilátky potlačují adaptivní imunitní systém a vedou k závažnějšímu onemocnění.

Jiná skupina (Ehrenfeld et. al., 2020), v článku převážně o širokém spektru autoimunitních onemocnění nalezených v souvislosti s předchozí infekcí SARS-CoV-2, také zkoumala, jak by mohl spike protein vyvolat takovou řadu onemocnění. V tabulce 1 tohoto odkazu uvádějí řetězce heptapeptidů v lidském proteomu, které se překrývají s spike proteinem generovaným SARS-CoV-2. Identifikovali 26 heptapeptidů nalezených u lidí a v spike proteinu. Je zajímavé poznamenat, že bylo zjištěno, že 2 z 26 překrývajících se heptapeptidů jsou sekvenční, což je nápadně dlouhý řetězec identických peptidů, které jsou společné mezi endogenními lidskými proteiny a spike proteinem. V komentáři k překrývajícím se peptidům, které objevili, a jejich potenciálu řídit mnoho typů autoimunity současně, komentují: "Klinický scénář, který se objevuje, je znepokojující." Opravdu, je.

V květnu 2020 byl v tomto ohledu publikován další důležitý článek od Vojdaniho a Kharraziana (2020). Autoři použili myší i králičí monoklonální protilátky proti spike proteinu 2003 SARS k testování reaktivity nejen proti spike proteinu SARS-CoV-2, ale také proti několika endogenním lidským proteinům. Zjistili, že existuje vysoká úroveň vazby nejen na spike protein SARS-CoV-2, ale i na širokou škálu endogenních proteinů. „Zjistili jsme, že nejsilnější reakce byly s transglutaminázou 3 (tTG3), transglutaminázou 2 (tTG2), ENA, myelinovým bazickým proteinem (MBP), mitochondriemi, jaderným antigenem (NA), α-myosinem, peroxidázou štítné žlázy (TPO) kolagen, claudin 5+6 a S100B. (Vojdani a Kharrazian, 2020).

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2(1), 10. května 2021 Strana | 402

 

Tato důležitá zjištění je třeba zdůraznit. Protilátky s vysokou vazebnou afinitou ke špičce SARS-CoV-2 a dalším proteinům mají také vysokou vazebnou afinitu k tTG (spojené s celiakií), TPO (Hashimotova tyreoiditida), myelinovému bazickému proteinu (roztroušená skleróza) a několika endogenním proteinům. Na rozdíl od autoimunitního procesu spojeného s primární aktivací patogenů trvá tato autoimunitní onemocnění obvykle roky, než se symptomaticky projeví.

Autoprotilátky generované spike proteinem, které předpověděl Lyons-Weiler (2020) a popsané výše, byly potvrzeny in vitro studií publikovanou nedávno. V tomto navazujícím článku Vojdani et. al., (2021) se znovu zabývali otázkou zkřížené reaktivity protilátek, tentokrát s použitím lidských monoklonálních protilátek (mAb) proti spike proteinu SARS-CoV-2 spíše než myších a králičích mAb. Jejich výsledky potvrdily a rozšířily jejich předchozí zjištění. "Při limitu 0,32 OD [optická hustota] reagovala protilátka proti membránovému proteinu SARS-CoV-2 s 18 z 55 testovaných antigenů." Těchto 18 endogenních antigenů zahrnuje reaktivitu na tkáň v játrech, mitochondriích, nervovém a trávicím systému, slinivce břišní a jinde v těle.

Ve zprávě o multisystémovém zánětlivém syndromu u dětí (MIS-C) Carter et. al. (2020) studovali 23 případů. Sedmnáct z 23 (68 %) pacientů mělo sérologické známky předchozí infekce SARS-CoV-2. Ze tří protilátek hodnocených v populaci pacientů (nukleokapsida, RBD a spike) byla optická hustota protilátek spike proteinu IgG (která kvantifikuje koncentrace protilátek proti standardizované křivce (Wikipedia, 2021)) nejvyšší (viz obrázek 1d v Carter et al. ., 2020).

O MIS-C se nyní běžně spekuluje, že je příkladem imunitní primární aktivace předchozí expozicí SARS-CoV-2 nebo jiným koronavirům. Buonsenso et. al. (2020) zhodnotili mnohočetné imunologické podobnosti mezi MIS-C a onemocněním souvisejícím s předchozí β-hemolytickou streptokokovou infekcí skupiny A (GAS). Autoři píší: „Můžeme spekulovat o tom, že vícenásobné vystavení dětí SARS-CoV-2 s rodiči s COVID-19 může fungovat jako aktivace imunitního systému, jak se to děje u GAS infekce, a u geneticky predisponovaných dětí vést k [MIS -C] voj. Další hypotézou je, že předchozí infekce jinými koronaviry, mnohem častější v dětské populaci, mohly připravit dětský imunitní systém na virus SARS-CoV-2.

V červnu 2019 Galeotti a Bayry (2020) zhodnotili výskyt jak autoimunitních, tak zánětlivých onemocnění u pacientů s COVID-19. Svou analýzu zaměřují na MIS-C. Po přezkoumání několika dříve publikovaných zpráv o časové souvislosti mezi COVID-19 a nástupem MIS-C a po popisu řady možných mechanistických souvislostí mezi nimi autoři poznamenali, že nebyla prokázána žádná příčinná souvislost. V poněkud prozíravém doporučení napsali: „K potvrzení této hypotézy by měla být zvážena jemná analýza homologie mezi různými antigeny SARS-CoV-2 a vlastními antigeny pomocí in silico přístupů a validace v experimentálních modelech. .“ Přesně tento typ analýzy in silico provedli Lyons-Weiler (2020) a Ehrenfeld et. al. (2020) popsaný v úvodních odstavcích této části, který zjistil těsnou homologii mezi virovými antigeny a vlastními antigeny. I když to nemusí definitivně potvrdit kauzální souvislost předpokládanou Galeottim a Bayrym, je to silný podpůrný důkaz.

Autoimunita je stále více uznávána jako následek COVID-19. Existuje několik zpráv o dříve zdravých jedincích, u kterých se vyvinula onemocnění, jako je idiopatická trombocytopenická purpura, Guillain-Barrého syndrom a autoimunitní hemolytická anémie (Galeotti a Bayry, 2020). Existují tři nezávislé kazuistiky systémového lupus erythemosus (SLE)

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 403

 

t s kožními projevy po symptomatickém COVID-19. V jednom případě měl 39letý muž počátek SLE dva měsíce po ambulantní léčbě COVID-19 (Zamani et.al., 2021). Další nápadný případ rychle progredujícího a fatálního SLE s kožními projevy popisuje Slimani et.al. (2021).

Autoprotilátky se velmi běžně vyskytují u pacientů s COVID-19, včetně protilátek nalezených v krvi (Vlachoyiannopoulos et. al., 2020) a mozkomíšním moku (CFS) (Franke et. al., 2021). Ačkoli se SARS-CoV-2 v mozkomíšním moku nenachází, existuje teorie, že autoprotilátky vytvořené v reakci na expozici SARS-CoV-2 mohou vést alespoň k části neurologických komplikací zdokumentovaných u pacientů s COVID-19. Jeden důležitý dopis redakci zaslali do časopisu Arthritis & Rheumatology Bertin et. al. (2020) zaznamenali vysokou prevalenci a silnou asociaci (p=0,009) autoprotilátek proti kardiolipinu u pacientů s COVID-19 se závažným onemocněním.

Zuo et. al. (2020) našli antifosfolipidové autoprotilátky u 52 % hospitalizovaných pacientů s COVID-19 a spekulovali, že tyto protilátky přispívají k vysokému výskytu koagulopatií u těchto pacientů. Schiaffino et. al. (2020) uvedli, že sérum vysokého procenta hospitalizovaných pacientů s COVID-19 obsahovalo autoprotilátky reagující na plazmatickou membránu hepatocytů a žaludečních buněk. U jednoho pacienta s Guillain-Barre syndromem bylo zjištěno, že má protilátkovou reaktivitu v mozkomíšním moku (CFS), což vedlo autory k názoru, že zkřížená reaktivita s proteiny v CFS by mohla vést k neurologickým komplikacím pozorovaným u některých pacientů s COVID-19. V novějším přehledu Gao et. al. (2021) zaznamenali vysoké hladiny autoprotilátek u pacientů s COVID-19 ve více studiích. Docházejí k závěru: „[Jedním z potenciálních vedlejších účinků podávání hromadné vakcíny by mohlo být sloučení [sic] autoimunitních onemocnění, zejména u jedinců, kteří jsou geneticky náchylní k autoimunitě."

Nedávná publikace shromažďuje velké množství důkazů o tom, že autoprotilátky proti širokému spektru receptorů a tkání lze nalézt u jedinců, kteří v minulosti prodělali infekci SARS-CoV-2. „Všech 31 bývalých pacientů s COVID-19 mělo 2 až 7 různých GPCR-fAAB [funkční autoprotilátky receptoru spojené s G-proteinem], které působily jako agonisté receptoru. (Wallukat et. al. 2021) Rozmanitost identifikovaných GPCR-fAAB, zahrnujících agonistickou i antagonistickou aktivitu na cílových receptorech, silně korelovala s řadou symptomů po COVID-19, včetně tachykardie, bradykardie, alopecie, deficitu pozornosti, PoTS , neuropatie a další.

Stejná studie, odkazující na autoprotilátky předpovězené Lyonsem-Weilerem (2020), uvedené výše, poznamenává se zjevným vážným znepokojením: „Spickový protein Sars-CoV-2 je potenciálním epitopovým cílem pro autoimunologické procesy vyvolané biomimikry [25]. Proto se domníváme, že bude nesmírně důležité prozkoumat, zda budou GPCR-fAAB také detekovatelné po imunizaci očkováním proti viru.

Přezkoumali jsme zde důkazy, že spike protein SARS-CoV-2 má rozsáhlou sekvenční homologii s mnoha endogenními lidskými proteiny a mohl by připravit imunitní systém směrem k rozvoji autozánětlivého i autoimunitního onemocnění. To je zvláště znepokojivé vzhledem k tomu, že protein byl přepracován se dvěma extra prolinovými zbytky, aby potenciálně bránil jeho clearance z oběhu prostřednictvím membránové fúze. Tato onemocnění se mohou projevit akutně a

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 404

 

a v relativně krátkých časových intervalech, jako je tomu u MIS-C, nebo by se potenciálně nemusela projevit měsíce nebo roky po expozici spike proteinu, ať už prostřednictvím přirozené infekce nebo vakcinací.

Mnoho lidí s pozitivním testem na COVID-19 nevykazuje žádné příznaky. Počet asymptomatických, PCR-pozitivních případů se mezi jednotlivými studiemi značně liší, od nízkých 1,6 % po nejvyšší 56,5 % (Gao et. al., 2020). Ti, kteří jsou necitliví vůči COVID-19, mají pravděpodobně velmi silný vrozený imunitní systém. Neutrofily a makrofágy zdravé slizniční bariéry rychle odstraňují viry, často bez potřeby tvorby jakýchkoli protilátek adaptivním systémem. Vakcína však záměrně zcela obchází slizniční imunitní systém, a to jak svou injekcí přes přirozené slizniční bariéry, tak její umělou konfigurací jako nanočástice obsahující RNA. Jak je uvedeno v Carsetti (2020), osoby se silnou vrozenou imunitní odpovědí téměř všeobecně zažívají buď asymptomatickou infekci, nebo pouze mírnou prezentaci onemocnění COVID-19. Přesto mohou čelit chronickému autoimunitnímu onemocnění, jak bylo popsáno dříve, jako důsledek nadměrné produkce protilátek v reakci na vakcínu, což v první řadě nebylo nutné.

Slezina, krevní destičky a trombocytopenie

Dr. Gregory Michael, porodník v Miami Beach, zemřel na krvácení do mozku 16 dní po podání první dávky vakcíny Pfizer/BioNtech COVID-19. Během tří dnů po očkování se u něj rozvinula idiopatická trombocytopenická purpura (ITP), autoimunitní porucha, při které imunitní buňky napadají a ničí krevní destičky. Počet jeho krevních destiček prudce klesl a to způsobilo neschopnost zastavit vnitřní krvácení, což vedlo k mrtvici, jak je popsáno v článku v New York Times (Grady a Mazzei, 2021). The New York Times navázaly druhým článkem, který pojednával o několika dalších případech ITP po očkování proti SARS-CoV-2 (Grady, 2021) a několika dalších výskytech prudkého poklesu krevních destiček a trombocytopenie po očkování proti SARS-CoV-2. hlášeny v systému hlášení nežádoucích příhod vakcín (VAERS).

 

1. Biodistribuce mRNA vakcín

Několik studií o vakcínách na bázi mRNA nezávisle potvrdilo, že slezina je hlavním centrem aktivity imunitní odpovědi. Studie vakcíny proti chřipkovému viru na bázi mRNA je mimořádně důležitá pro zodpovězení otázky biologické distribuce mRNA ve vakcíně. Tato vakcína, stejně jako vakcíny SARS-CoV-2, byla navržena jako lipidové nanočástice s modifikovanou RNA kódující hemaglutinin (ekvivalent povrchového fúzního proteinu ke spike proteinu v koronavirech) a byla podávána prostřednictvím svalové injekce. Koncentrace mRNA byla sledována v průběhu času ve vzorcích různých tkání a byla zaznamenána maximální koncentrace pozorovaná na každém místě. Není překvapením, že koncentrace byla nejvyšší ve svalu v místě vpichu (5 680 ng/ml). Tato hladina v průběhu času pomalu klesala a dosáhla poloviny původní hodnoty 18,8 hodin po injekci. Další nejvyšší hladina byla pozorována v proximální lymfatické uzlině, vrcholila při 2 120 ng/ml a neklesla na polovinu této hodnoty až o 25,4 hodiny později. Mezi orgány byly zdaleka nejvyšší hladiny nalezeny ve slezině (86,69 ng/ml) a játrech (47,2 ng/ml). Jinde v těle byla koncentrace na 100- až 1000-krát nižších úrovních. Zejména distální lymfatické uzliny měly maximální koncentraci pouze 8 ng/ml. Došli k závěru, že mRNA se distribuuje z místa vpichu do jater a sleziny prostřednictvím lymfatického systému a nakonec se dostane do celkového oběhu. To se pravděpodobně děje prostřednictvím jeho transportu uvnitř makrofágů a dalších imunitních buněk, které jej přijímají

 

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2(1), 10. května 2021 Strana | 405

 

 

svalové místo vpichu. Znepokojivě zasahuje také do mozku, i když na mnohem nižších úrovních (Bahl et al., 2017). Hodnotící zpráva Evropské lékové agentury pro vakcínu Moderna také uvádí, že mRNA mohla být detekována v mozku po intramuskulárním podání v množství asi 2 % hladiny nalezené v plazmě (Evropská léková agentura, 2021).

V dalším experimentu prováděném za účelem sledování biodistribuční dráhy RNA vakcín byla RNA vakcína proti vzteklině podána intramuskulárně potkanům v jediné dávce. Vakcína obsahovala kód pro imunogenní protein vztekliny a také kód pro RNA polymerázu a byla formulována jako nanoemulze typu olej ve vodě. Není tedy zcela reprezentativní pro vakcíny mRNA SARS-CoV-2. Nicméně jeho intramuskulární podání a jeho závislost na příjmu RNA imunitními buňkami pravděpodobně znamená, že by migroval přes tkáně podobnou cestou jako vakcína SARS-CoV-2. Autoři pozorovali zvětšení drenážních lymfatických uzlin a tkáňové studie odhalily, že RNA vztekliny se objevila zpočátku v místě vpichu a v drenážních lymfatických uzlinách během jednoho dne a byla také nalezena v krvi, plicích, slezině a játrech (Stokes et al., 2020). Tyto výsledky jsou v souladu s výše uvedenou studií o chřipkových mRNA vakcínách.

Nakonec studie porovnávající nanočástice mRNA exprimující luciferázu s dendritickými buňkami mRNA exprimujícími luciferázu jako alternativní přístup k vakcinaci odhalila, že signál luciferázy zasáhl širší rozsah lymfoidních míst s mechanismem dodávání nanočástic. Ještě důležitější je, že signál luciferázy byl koncentrován ve slezině pro nanočástice ve srovnání s dominancí v plicích pro dendritické buňky (Firdessa-Fite a Creuso, 2020).

 

2. Imunitní trombocytopenie

Imunitní trombocytopenie (ITP) se ukázala jako důležitá komplikace COVID-19 (Bhattacharjee a Banerjee, 2020). V mnoha případech se objeví po úplném uzdravení z nemoci, tj. poté, co byl virus odstraněn, což naznačuje, že jde o autoimunitní jev. Pravděpodobná cesta, kterou by se ITP mohla objevit po očkování, je migrace imunitních buněk nesoucích náklad nanočástic mRNA přes lymfatický systém do sleziny. Tyto imunitní buňky by produkovaly spike protein podle kódu v nanočásticích a spike protein by indukoval B lymfocyty tvorbu IgG protilátek proti němu.

ITP se zpočátku projevuje jako petechie nebo purpura na kůži a/nebo krvácení z povrchů sliznic. Má vysoké riziko úmrtí v důsledku krvácení a mrtvice. ITP je charakterizována jak zvýšenou destrukcí krevních destiček, tak sníženou produkcí krevních destiček a autoprotilátky hrají klíčovou roli (Sun a Shan, 2019). Krevní destičky jsou potaženy antiagregačními protilátkami a imunitními komplexy, což indukuje jejich odstraňování fagocyty.

Zejména za podmínek narušené autofagie může výsledná signální kaskáda vést také k potlačení produkce megakaryocytů v kostní dřeni, které jsou prekurzorovými buňkami pro produkci krevních destiček (Sun and Shan, 2019). Případová studie pacienta s diagnózou COVID-19 je odhalující, protože se u něj rozvinula náhlá trombocytopenie pár dní poté, co byl propuštěn z nemocnice na základě negativního testu nukleové kyseliny na COVID-19. Po tomto vývoji bylo ověřeno, že pacient měl snížený počet megakaryocytů produkujících krevní destičky, zatímco autoimunitní protilátky byly negativní, což naznačuje problém s produkcí krevních destiček spíše než s destrukcí krevních destiček (Chen et al., 2020).

 

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2(1), 10. května 2021 Strana | 406

 

Autofagie je nezbytná pro čištění poškozených proteinů, organel a bakteriálních a virových patogenů. Změny v autofagických drahách se objevují jako charakteristický znak patogeneze mnoha respiračních virů, včetně viru chřipky, MERS-CoV, SARS-CoV a, což je důležité, SARS-CoV-2 (Limanaqi et al., 2020). Autofagie je jistě kritická při odstraňování spike proteinu produkovaného imunitními buňkami naprogramovanými tak, aby jej produkovaly prostřednictvím mRNA vakcín.

Dá se spekulovat, že narušená autofagie brání vylučování spike proteinu produkovaného makrofágy z mRNA vakcíny. Jak si ukážeme později, krevní destičky mají autofagické proteiny a používají autofagii k odstranění virů. Zhoršená autofagie je charakteristickým rysem ITP a může být klíčová pro autoimunitní útok na krevní destičky (Wang et al., 2019).

 

3. Kritická role pro slezinu

Slezina je největší sekundární lymfoidní orgán u lidí a obsahuje až 1/3 zásob krevních destiček v těle. Slezina je primárním místem pro destrukci krevních destiček během ITP, protože řídí protilátkovou odpověď proti krevním destičkám. Dvě hlavní autoprotilátky spojené s ITP jsou proti imunoglobulinu G (IgG) a komplexu glykoproteinu (GP) IIb/IIIa na krevních destičkách (Aslam et al., 2016).

Slezina hraje ústřední roli při odstraňování cizích antigenů a syntéze IgG B buňkami. Po expozici antigenu, jako je spike protein, získávají neutrofily v okrajové zóně sleziny schopnost interagovat s B buňkami, což vyvolává produkci protilátek (Puga et al., 2011). To je pravděpodobně rozhodující pro úspěšný výsledek očkování. Pseudouridinová modifikace mRNA je důležitá pro zajištění přežití RNA dostatečně dlouho, aby se dostala do sleziny. V experimentu s injekcí nanočástic mRNA do myší bylo možné jak dodanou mRNA, tak kódovaný protein detekovat ve slezině 1, 4 a 24 hodin po injekci, ve výrazně vyšších hladinách, než když byla použita nemodifikovaná RNA (Karikó a kol., 2008).

Sofistikovaný mechanismus zkřížené komunikace mezi destičkami a neutrofily ve slezině může vést k trombocytopenii, zprostředkované patologickou odpovědí zvanou NETóza. Platelet-TLR7 (toll-like receptor 7) rozpoznává částice chřipky v oběhu a vede k jejich pohlcení a endocytóze krevními destičkami. Po pohlcení virů krevní destičky stimulují neutrofily, aby uvolňovaly svou DNA v neutrofilních extracelulárních pastech (NET) (Koupenová et al., 2019) a DNA v nadměrném množství spouští protrombotickou kaskádu.

 

4. Poučení z chřipky

Virus chřipky, stejně jako koronavirus, je jednovláknový RNA virus. Trombocytopenie je častou komplikací chřipkové infekce a její závažnost předpovídá klinické výsledky u kriticky nemocných pacientů (Jansen et al., 2020). Krevní destičky obsahují ve svých membránách hojné glykoproteiny, které působí jako receptory a podporují adhezi ke stěně endotelu. Autoprotilátky proti destičkovým glykoproteinům se nacházejí u většiny pacientů s autoimunitní trombocytopenií (Lipp et al., 1998). Virus chřipky se váže na buňky prostřednictvím glykoproteinů a uvolňuje enzym zvaný neuraminidáza, který dokáže rozložit glykosaminoglykany navázané na glykoproteiny a uvolnit je. Tato akce pravděpodobně vystaví glykoproteiny krevních destiček B lymfocytům, což vyvolá produkci autoprotilátek. Bylo prokázáno, že neuraminidáza exprimovaná patogenem Streptococcus pneumoniae desialyluje krevní destičky, což vede k hyperaktivitě krevních destiček (Kullaya et al., 2018).

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2(1), 10. května 2021 Strana | 407

 

Zdá se, že krevní destičky hrají důležitou roli při odstraňování virů. Během jedné minuty poté, co byly krevní destičky inkubovány společně s chřipkovými viry, se již viry na krevní destičky uchytily. Následná internalizace, pravděpodobně fagocytózou, dosáhla vrcholu za 30 minut (Jansen et al., 2020).

Spike protein SARS-CoV-2 váže kyselinu sialovou, což znamená, že by se mohl připojit ke glykoproteinům v membránách krevních destiček (Baker et al., 2020). Existuje strukturální podobnost mezi spike proteinem S1 v SARS CoV a neuraminidázou exprimovanou virem chřipky, což může znamenat, že spike protein má neuraminidázovou aktivitu (Zhang et al., 2004). Několik virů exprimuje neuraminidázu a ta obecně působí enzymaticky tak, že katabolizuje glykany v glykoproteinech desialylací.

 

Zdá se tedy pravděpodobné, že po vakcinaci mRNA by mohla následovat nebezpečná kaskáda vedoucí k ITP, a to i bez přítomnosti živého viru, zejména v souvislosti s narušenou autofagií. Imunitní buňky ve svalu paže přijímají částice RNA a cirkulují v lymfatickém systému a hromadí se ve slezině. Tam imunitní buňky produkují hojný spike protein, který se váže na glykoproteiny krevních destiček a desialyluje je. Interakce krevních destiček s neutrofily způsobuje NETózu a spuštění zánětlivé kaskády. Exponované glykoproteiny se stávají cíli pro autoimunitní protilátky, které pak napadají a odstraňují krevní destičky, což vede k rychlému poklesu počtu krevních destiček a k život ohrožující události.

 

Aktivace latentního herpes zoster

 

Pozorovací studie provedená v Tel Aviv Medical Center a Carmel Medical Center v Haifě v Izraeli zjistila významně zvýšený výskyt herpes zoster po očkování Pfizer (Furer 2021). Tato observační studie sledovala pacienty s preexistujícím autoimunitním zánětlivým revmatickým onemocněním (AIIRD). Mezi 491 pacienty s AIIRD během sledovaného období bylo 6 (1,2 %) diagnostikováno herpes zoster jako vůbec první diagnóza mezi 2 dny a 2 týdny po první nebo druhé vakcinaci. V kontrolní skupině 99 pacientů nebyly identifikovány žádné případy herpes zoster.

Databáze VAERS CDC, dotazovaná 19. dubna 2021, obsahuje 278 zpráv o herpes zoster po očkování Moderna nebo Pfizer. Vzhledem k dokumentovanému nedostatečnému hlášení VAERS (Lazarus et al. 2010) a vzhledem k asociační povaze hlášení VAERS není možné prokázat žádnou příčinnou souvislost mezi očkováním a hlášeními zoster. Domníváme se však, že výskyt pásového oparu je dalším důležitým „signálem“ u VAERS.

Toto zvýšené riziko pro pásový opar, pokud je platné, může mít důležité širší důsledky. Několik studií ukázalo, že pacienti s primární nebo získanou imunitní nedostatečností jsou náchylnější k těžké infekci herpes zoster (Ansari et al., 2020). To naznačuje, že mRNA vakcíny mohou potlačovat vrozenou imunitní odpověď. Mezi TNF-a a interferonem typu I u autoimunitních onemocnění existuje křížová komunikace, přičemž každý z nich potlačuje druhý (Palucka et al., 2005). Interferon typu I inhibuje replikaci viru varicella-zoster (Ku et al., 2016). TNF-a je prudce upregulován při zánětlivé reakci, která je indukována lipidovými nanočásticemi ve vakcíně. Jeho upregulace je také spojena s chronickým zánětlivým stavem revmatoidní artritidy (Matsuno et al., 2002). Exuberantní exprese TNF-α po vakcinaci může interferovat s odpovědí INF-α dendritických buněk, která udržuje latentní pásový opar pod kontrolou.

 

(International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2(1), 10. května 2021 Strana | 408)

 

Spike proteinová toxicita

Nyní se objevuje obrázek, že SARS-CoV-2 má vážné účinky na vaskulaturu v mnoha orgánech, včetně vaskulatury mozku. Jak již bylo zmíněno dříve, spike protein usnadňuje vstup viru do hostitelské buňky vazbou na ACE2 v plazmatické membráně. ACE2 je integrální membránový protein typu I, který štěpí angiotensin II na angiotensin(1-7), čímž odstraňuje angiotenzin II a snižuje krevní tlak. V sérii prací Yuichiro Suzuki ve spolupráci s dalšími autory předložil silný argument, že spike protein sám o sobě může způsobit signalizační odpověď ve vaskulatuře s potenciálně rozšířenými důsledky (Suzuki, 2020; Suzuki et al., 2020; Suzuki et al. ., 2021; Suzuki a Gychka, 2021). Tito autoři pozorovali, že v závažných případech COVID-19 způsobuje SARS-CoV-2 významné morfologické změny plicní vaskulatury. Posmrtná analýza plic pacientů, kteří zemřeli na COVID-19, odhalila histologické rysy ukazující ztluštění cévní stěny, zejména v důsledku hypertrofie tunica media. Zvětšené buňky hladkého svalstva se zakulatily, s oteklými jádry a cytoplazmatickými vakuolami (Suzuki et al., 2020). Dále prokázali, že vystavení kultivovaných buněk hladkého svalstva lidské plicní tepny podjednotce spike proteinu S1 SARS-CoV-2 bylo dostatečné k podpoře buněčné signalizace bez zbytku virových složek.

 

Obr. 2: Jednoduchý model procesu, kterým by spike protein produkovaný prostřednictvím mRNA vakcín mohl vyvolat patologickou reakci odlišnou od žádoucí indukce protilátek k potlačení vstupu viru. Překresleno se svolením Suzuki a Gychky, 2021. 

 

 

Následné práce (Suzuki et al., 2021, Suzuki a Gychka, 2021) ukázaly, že spike protein S1 podjednotka potlačuje ACE2, což způsobuje stav připomínající plicní arteriální hypertenzi (PAH), závažné plicní onemocnění s velmi vysokou mortalitou. Jejich model je znázorněn zde na obrázku 2. Suzuki a Gychka (2021) zlověstně napsali: „Tyto studie in vivo tedy prokázaly, že spike protein SARS-CoV-1 (bez zbytku viru) snižuje expresi ACE2, zvyšuje hladinu angiotenzinu II a zhoršuje poškození plic. „Studie in vivo“, o kterých se zde zmiňují (Kuba et al., 2005), ukázaly, že poškození plic vyvolané koronavirem SARS bylo primárně způsobeno inhibicí ACE2 spike proteinem SARS-CoV, což způsobilo velký nárůst angiotenzinu-II. . Suzuki a kol. (2021) dále experimentálně prokázali, že složka S1 viru SARS-CoV-2 v nízké koncentraci 130 pM aktivovala signální dráhu MEK/ERK/MAPK k podpoře buněčného růstu. Spekulovali, že tyto účinky nebudou omezeny na plicní vaskulaturu. Signální kaskáda spuštěná v srdeční vaskulatuře by způsobila onemocnění koronárních tepen a aktivace v mozku by mohla vést k mrtvici. Lze také předpokládat systémovou hypertenzi. Předpokládali, že tato schopnost spike proteinu podporovat plicní arteriální hypertenzi by mohla predisponovat pacienty, kteří se uzdraví

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 409

 

z SARS-CoV-2 k pozdějšímu rozvoji srdečního selhání pravé komory (aby se jim rozvinulo... pozn. překl.). Dále navrhli, že k podobnému účinku by mohlo dojít v reakci na vakcíny mRNA, a varovali před potenciálními dlouhodobými důsledky pro děti i dospělé, kteří dostali vakcíny COVID-19 na bázi spike proteinu (Suzuki a Gychka, 2021).

Zajímavá studie Lei et. al. (2021) zjistili, že pseudovirus – koule zdobené proteinem SARS-CoV-2 S1, ale postrádající virovou DNA v jejich jádru – způsobil zánět a poškození jak v tepnách, tak v plicích myší exponovaných intratracheálně. Poté vystavili zdravé lidské endoteliální buňky stejným pseudovirovým částicím. Vazba těchto částic na endoteliální ACE2 receptory vedla k mitochondriálnímu poškození a fragmentaci v těchto endoteliálních buňkách, což vedlo k charakteristickým patologickým změnám v asociované tkáni. Tato studie jasně ukazuje, že samotný spike protein, neasociovaný se zbytkem virového genomu, je dostatečný k tomu, aby způsobil poškození endotelu spojené s COVID-19. Důsledky pro vakcíny, které mají přimět buňky k výrobě spike proteinu, jsou jasné a jsou zřejmým důvodem k obavám.

Neurologické příznaky spojené s COVID-19, jako je bolest hlavy, nevolnost a závratě, encefalitida a smrtelné mozkové krevní sraženiny, to vše jsou indikátory škodlivých virových účinků na mozek. Buzhdygan a kol. (2020) navrhli, že primární lidské mozkové mikrovaskulární endoteliální buňky by mohly způsobit tyto příznaky. ACE2 je všudypřítomně exprimován v endoteliálních buňkách v mozkových kapilárách. Exprese ACE2 je upregulována v mozkové vaskulatuře ve spojení s demencí a hypertenzí, což jsou oba rizikové faktory pro špatné výsledky COVID-19. Ve studii hematoencefalické bariéry in vitro složka S1 spike proteinu podporovala ztrátu integrity bariéry, což naznačuje, že spike protein působící samostatně spouští prozánětlivou reakci v mozkových endoteliálních buňkách, což by mohlo vysvětlit neurologické důsledky onemocnění (Buzhdygan et al., 2020). Důsledky tohoto pozorování jsou znepokojivé, protože mRNA vakcíny indukují syntézu spike proteinu, který by teoreticky mohl působit podobným způsobem a poškodit mozek.

Špičkový protein generovaný endogenně vakcínou by mohl také negativně ovlivnit mužská varlata, protože receptor ACE2 je vysoce exprimován v Leydigových buňkách ve varlatech (Verma et al., 2020). Několik studií nyní ukázalo, že spike protein koronaviru je schopen získat přístup k buňkám ve varlatech prostřednictvím receptoru ACE2 a narušit samčí reprodukci (Navarra et al., 2020; Wang a Xu, 2020). Práce zahrnující posmrtné vyšetření varlat šesti mužských pacientů s COVID-19 nalezla mikroskopický důkaz spike proteinu v intersticiálních buňkách ve varlatech pacientů s poškozenými varlaty (Achua et al., 2021).

 

Možná souvislost s prionovými chorobami a neurodegenerací

Prionová onemocnění jsou sbírkou neurodegenerativních onemocnění, která jsou vyvolána chybným skládáním důležitých tělesných proteinů, které tvoří toxické oligomery, které se nakonec vysrážejí jako fibrily a způsobují rozsáhlé poškození neuronů. Stanley Prusiner poprvé vymyslel název „prion“ k popisu těchto chybně složených proteinů (Prusiner, 1982). Nejznámější prionovou nemocí je MADCOW nemoc (bovinní spongiformní encefalopatie), která se stala epidemií u evropského skotu od 80. let 20. století. Web CDC o prionových chorobách uvádí, že „prionové choroby jsou obvykle rychle progresivní a vždy smrtelné“. (Center for Disease Control and Prevention, 2018). Nyní se věří, že mnoho neurodegenerativních onemocnění, včetně Alzheimerovy choroby, Parkinsonovy choroby a      

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2(1), 10. května 2021 Strana | 410

 

Nyní se věří, že mnoho neurodegenerativních onemocnění, včetně Alzheimerovy choroby, Parkinsonovy choroby a amyotrofické laterální sklerózy (ALS), může být prionovými chorobami, a výzkumníci identifikovali specifické proteinové infekční částice spojené s těmito chorobami (Weickenmeier et al., 2019).

Kromě toho výzkumníci identifikovali charakteristický motiv spojený s náchylností k chybnému skládání do toxických oligomerů, nazývaný motiv glycinového zipu. Je charakterizována vzorem dvou glycinových zbytků oddělených třemi intervenujícími aminokyselinami, reprezentovanými jako GxxxG. Hovězí prion spojený s MADCOW má působivou sekvenci deseti GxxxG v řadě (viz uniprot.org/uniprot/P10279).

Obecněji je motiv GxxxG společným znakem transmembránových proteinů a glyciny hrají zásadní roli při zesíťování a-helixů v proteinu (Mueller et al., 2014). Prionové proteiny se stávají toxickými, když se α-helixy špatně skládají jako β-listy a proteinu je pak narušena jeho schopnost vstupovat do membrány (Prusiner, 1982). Glyciny v transmembránových motivech glycinového zipu v amyloid-β prekurzorovém proteinu (APP) hrají ústřední roli při chybném skládání amyloidu-β spojeného s Alzheimerovou chorobou (Decock et al., 2016). APP obsahuje celkem čtyři motivy GxxxG.

Když vezmeme v úvahu, že spike protein SARS-CoV-2 je transmembránový protein a že ve své sekvenci obsahuje pět motivů GxxxG (viz uniprot.org/uniprot/P0DTC2), je extrémně pravděpodobné, že by se mohl chovat jako prion. Jedna ze sekvencí GxxxG je přítomna v její membránové fúzní doméně. Připomeňme, že mRNA vakcíny jsou navrženy se změněnou sekvencí, která nahrazuje dvě sousední aminokyseliny ve fúzní doméně párem prolinů. Toto je děláno záměrně, aby donutil protein zůstat ve svém otevřeném stavu a znesnadnil mu spojení s membránou. Zdá se nám to jako nebezpečný krok k nesprávnému složení, které může vést k prionové nemoci.

Práce publikovaná J. Bartem Classenem (2021) navrhla, že spike protein v mRNA vakcínách by mohl způsobit prionová onemocnění, zčásti díky své schopnosti vázat se na mnoho známých proteinů a indukovat jejich chybné skládání na potenciální priony. Idrees a Kumar (2021) navrhli, že složka spike proteinu S1 je náchylná působit jako funkční amyloid a vytvářet toxické agregáty. Tito autoři napsali, že S1 má schopnost „tvořit amyloidní a toxické agregáty, které mohou fungovat jako semena agregovat mnoho chybně poskládaných mozkových proteinů a mohou nakonec vést k neurodegeneraci“.

Podle Tetze a Tetze (2020) má forma spike proteinu v SARS-CoV-2 prionové oblasti, které nejsou přítomny v spike proteinech pro jiné koronaviry. I když to bylo hlášeno v nerecenzovaném článku, autoři publikovali předchozí článek v roce 2018 identifikující oblasti podobné prionům ve více eukaryotických virech, takže mají v této oblasti značné odborné znalosti (Tetz a Tetz, 2018).

Poslední bod se týká zejména informací o vakcíně Pfizer. Veřejná hodnotící zpráva Evropské lékové agentury (EMA) je dokument předložený k získání souhlasu s uvedením vakcíny na trh v Evropě. Podrobně popisuje přehled výrobního procesu a také širokou škálu souvisejících testovacích dat. Jedním z odhalení je přítomnost „fragmentovaných druhů“ RNA v injekčním roztoku. Jedná se o fragmenty RNA vzniklé předčasným ukončením procesu transkripce z templátu DNA. Tyto fragmenty, jsou-li translatovány buňkou po injekci, by generovaly neúplné spike proteiny, což by opět mělo za následek změněnou a nepředvídatelnou trojrozměrnou strukturu a fyziologický dopad, který je v nejlepším případě neutrální a v nejhorším případě škodlivý pro fungování buněk. V komerčně vyráběných produktech bylo nalezeno podstatně více těchto fragmentovaných

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2(1), 10. května 2021 Strana | 411

 

V komerčně vyráběných produktech bylo nalezeno podstatně více těchto fragmentovaných forem RNA než v produktech používaných v klinických studiích. Ty byly vyrobeny mnohem přísněji kontrolovaným výrobním procesem.

Pfizer tvrdí, že fragmenty RNA „pravděpodobně... nepovedou k expresi proteinů“ kvůli jejich předpokládané rychlé degradaci v buňce. Nebyla však předložena žádná data, která by vyloučila expresi proteinu, takže recenzenti mohli komentovat: „Tyto formy [fragmentované RNA] jsou špatně charakterizovány a omezené údaje poskytnuté pro expresi proteinů plně neřeší nejistoty související s rizikem translace proteinů. /peptidy jiné než zamýšlený spike protein“ (EMA 2020). Pokud je nám známo, od té doby nebyly k dispozici žádné údaje.

I když netvrdíme, že nespikové proteiny generované z fragmentované RNA by byly špatně složené nebo jinak patologické, věříme, že by přinejmenším přispěly k buněčnému stresu, který podporuje konformační změny spojené s priony v přítomném proteinu spike.

 

 

1. Poučení z Parkinsonovy choroby

 

 

Parkinsonova choroba je neurodegenerativní onemocnění spojené s ukládáním Lewyho tělísek v mozku a hlavním proteinem nacházejícím se v těchto tělískách je α-synuklein. Tento protein, a-Synuclein, je jistě prionům podobný, pokud se za určitých podmínek agreguje do toxických rozpustných oligomerů a fibril (Lema Tomé et al., 2013). Výzkum ukázal, že chybně poskládaný α-synuklein se může nejprve vytvořit ve střevě a poté odtud putovat do mozku podél bloudivého nervu, pravděpodobně ve formě exozomů uvolněných z umírajících buněk, kde chybně poskládaný protein vznikl (Kakarla et al., 2020; Steiner a kol., 2011). Buněčné podmínky, které podporují chybné skládání, zahrnují jak kyselé pH, tak vysokou expresi zánětlivých cytokinů. Je jasné, že bloudivý nerv je kritický pro přenos špatně složených proteinů do mozku, protože přerušení bloudivého nervu chrání před Parkinsonovou chorobou. Atrofie vagusového nervu ve spojení s Parkinsonovou chorobou poskytuje další důkaz o zapojení vagusového nervu do transportu chybně složených oligomerů α-synukleinu ze střeva do mozku (Walter et al., 2018). Další cesta vede přes čichový nerv a ztráta čichu je časným příznakem Parkinsonovy choroby. Častým příznakem infekce SARS-CoV-2 je také útlum nebo ztráta čichu.

Existuje mnoho paralel mezi a-synukleinem a spike proteinem, což naznačuje možnost prionového onemocnění po očkování. Již jsme ukázali, že mRNA ve vakcíně končí ve vysokých koncentracích v játrech a slezině, dvou orgánech, které jsou dobře propojeny s bloudivým nervem. Kationtové lipidy ve vakcíně vytvářejí kyselé pH vedoucí k chybnému skládání a také vyvolávají silnou zánětlivou reakci, což je další predisponující stav.

Germinální centra jsou struktury ve slezině a dalších sekundárních lymfoidních orgánech, kde folikulární dendritické buňky prezentují antigeny B buňkám, které zase zdokonalují svou protilátkovou odpověď. Výzkumníci prokázali, že mRNA vakcíny, na rozdíl od rekombinantních proteinových vakcín, vyvolávají silný vývoj neutralizačních protilátek v těchto zárodečných centrech ve slezině (Lederer et al., 2020). To však také znamená, že mRNA vakcíny navozují ideální situaci pro tvorbu prionu z spike proteinu a jeho transport přes exozomy podél bloudivého nervu do mozku.

Studie ukázaly, že šíření prionu z jednoho zvířete na druhé se nejprve objevuje v lymfoidních tkáních, zejména ve slezině. Diferencované folikulární dendritické buňky jsou ústředním bodem procesu, protože akumulují špatně složené prionové proteiny (Al-Dybiat et al., 2019). Zánětlivá reakce

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2(1), 10. května 2021 Strana | 412

 

upreguluje syntézu a-synukleinu v těchto dendritických buňkách, čímž se zvyšuje riziko tvorby prionů. Priony, které se hromadí v cytoplazmě, jsou zabaleny do lipidových tělísek, která se uvolňují jako exozomy (Liu et al., 2017). Tyto exozomy nakonec cestují do mozku a způsobují onemocnění.

 

2. Vylučování vakcíny

Na internetu se hodně mluvilo o možnosti, že očkovaní lidé způsobí onemocnění u neočkovaných lidí v těsné blízkosti. I když se to může zdát těžko uvěřitelné, existuje pravděpodobný proces, kterým by k tomu mohlo dojít prostřednictvím uvolnění exozomů z dendritických buněk ve slezině obsahujících chybně složené spike proteiny v komplexu s jinými prionovými rekonformovanými proteiny. Tyto exosomy mohou cestovat do vzdálených míst. Není nemožné si představit, že jsou uvolňovány z plic a vdechovány blízkým člověkem. Extracelulární vezikuly, včetně exozomů, byly detekovány ve sputu, hlenu, tekutině epiteliální výstelky a tekutině z bronchoalveolární laváže ve spojení s respiračními onemocněními (Lucchetti et al., 2021).

Studie fáze 1/2/3, kterou provedla společnost BioNTech o vakcíně mRNA Pfizer, v protokolu studie naznačila, že předpokládala možnost sekundární expozice vakcíně (BioNTech, 2020). Protokol obsahoval požadavek, aby účastníci studie hlásili „expozici během těhotenství“. Poté uvedli příklady „expozice životního prostředí během těhotenství“, která zahrnovala expozici „inhalačnímu zásahu nebo kontaktu s pokožkou“. Navrhli dokonce dvě úrovně nepřímé expozice: „Mužský rodinný příslušník nebo poskytovatel zdravotní péče, který byl vystaven studijnímu zásahu inhalací nebo kontaktem s kůží, pak vystavuje svou partnerku před početím nebo přibližně v době početí.“

 

Vznik nových variant SARS-CoV-2

Zajímavá hypotéza byla navržena v článku publikovaném v Nature, který popisuje případ vážného onemocnění COVID-19 u pacienta s rakovinou, který užíval imunosupresivní chemoterapeutické léky proti rakovině (Kemp et al., 2021). Pacient po přijetí do nemocnice přežil 101 dní, nakonec v boji s virem podlehl. Pacient neustále vylučoval viry po celých 101 dní, a proto byl přemístěn do podtlakové vysokovzdušné izolační místnosti pro infekční choroby, aby se zabránilo nakažlivému šíření.

Během pobytu v nemocnici byl pacient léčen Remdesivirem a následně dvěma koly plazmy obsahující protilátky odebrané jedincům, kteří se zotavili z COVID-19 (rekonvalescentní plazma). Teprve po ošetření plazmou začal virus rychle mutovat a nakonec se objevil nový dominantní kmen, ověřený ze vzorků odebraných z nosu a krku pacienta. Pacient s oslabenou imunitou nabízí malou podporu cytotoxických T-buněk k odstranění viru.

Experiment in vitro ukázal, že tento mutantní kmen měl sníženou citlivost na více jednotek rekonvalescentní plazmy odebrané několika uzdraveným pacientům. Autoři navrhli, že podávané protilátky ve skutečnosti zrychlily rychlost mutací ve viru, protože pacient nebyl schopen zcela odstranit virus kvůli své slabé imunitní odpovědi. To umožnilo spustit program „přežití nejschopnějších“ a nakonec naplnit tělo pacienta novým kmenem odolným proti protilátkám. Prodloužená virová replikace u tohoto pacienta vedla k „virovému imunitnímu úniku“ a podobné odolnosti

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2(1), 10. května 2021 Strana | 413

 

kmeny by se mohly potenciálně velmi rychle šířit v exponované populaci (Kemp et al., 2021). Ve skutečnosti by podobný proces mohl pravděpodobně fungovat při produkci vysoce nakažlivých nových kmenů, které se nyní objevují ve Spojeném království, Jižní Africe a Brazílii.

Pokud jde o tento experiment, ve vztahu k vakcínám mRNA máme přinejmenším dvě obavy. První je, že prostřednictvím pokračující infekce imunokompromitovaných pacientů můžeme očekávat pokračující vznik dalších nových kmenů, které jsou rezistentní vůči protilátkám vyvolaným vakcínou, takže vakcína může rychle zastarat a může být potřeba obyvatelstvo podstoupit další hromadnou očkovací kampaň. Již publikovaná studie vědců ze společnosti Pfizer ukázala, že účinnost vakcíny je u mnoha těchto variantních kmenů snížena. Vakcína byla pouze ze 2/3 účinná proti jihoafrickému kmeni než proti původnímu kmeni (Liu et al., 2021).

Druhou hrozivější úvahou je zamyslet se nad tím, co se stane s pacientem s oslabenou imunitou po očkování. Je možné, že budou reagovat na vakcínu produkcí protilátek, ale tyto protilátky nebudou schopny zadržet onemocnění po expozici COVID-19 kvůli narušené funkci cytotoxických T buněk. Tento scénář se příliš neliší od podávání rekonvalescentní plazmy pacientům s oslabenou imunitou, a tak by mohl stejným způsobem vyvolat evoluci kmenů rezistentních na protilátky, pouze v mnohem větším měřítku. Tato možnost bude jistě využita k obhajobě opakovaných kol vakcín každých několik měsíců s rostoucím počtem virových variant kódovaných do vakcín. Tohle je závod ve zbrojení, který pravděpodobně prohrajeme.

 

Potenciál pro trvalou inkorporaci genu Spike Protein do lidské DNA

Tvrdilo se, že vakcíny založené na mRNA jsou bezpečnější než vakcíny s vektorem DNA, které fungují tak, že do DNA viru začlení genetický kód pro cílový antigenní protein, protože RNA se nemůže neúmyslně začlenit do lidského genomu. Není však vůbec jasné, že je to pravda. Nyní je známo, že klasický model DNA → RNA → protein je falešný. Nyní je nesporné, že existuje velká třída virů nazývaných retroviry, které nesou geny, které reverzně přepisují RNA zpět do komplementární DNA (cDNA). V roce 1975 se Howard Temin, Renato Dulbecco a David Baltimore podělili o Nobelovu cenu za fyziologii a medicínu v roce 1975 za objev reverzní transkriptázy a její syntézu retroviry (jako je virus lidské imunodeficience (HIV)) k odvození DNA z RNA (Temin a Mizutani, 1970, Baltimore, 1970).

Mnohem později bylo zjištěno, že reverzní transkriptáza není jedinečná pro retroviry. Více než třetina lidského genomu je věnována záhadným mobilním prvkům DNA zvaným SINE a LINE (krátké a dlouhé rozptýlené jaderné prvky). LINE poskytují schopnosti reverzní transkriptázy pro konverzi RNA na DNA a SINE poskytují podporu pro integraci DNA do genomu. Tyto prvky tedy poskytují nástroje potřebné pro přeměnu RNA na DNA a její začlenění do genomu, aby byl nový gen zachován i pro budoucí generace (Weiner, 2002).

SINE a LINE jsou členy větší třídy genetických prvků nazývaných retrotranspozony. Retrotranspozony mohou zkopírovat a vložit svou DNA na nové místo v genomu prostřednictvím meziproduktu RNA,

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 414

 

přičemž mohou do procesu zavést genetické změny (Pray, 2008). Retrotranspozony, známé také jako „skákací geny“, byly poprvé identifikovány genetičkou Barbarou McClintock z Cold Spring Harbor Laboratory v New Yorku před více než 50 lety (McClintock, 1965). Mnohem později, v roce 1983, byla za tuto práci oceněna Nobelovou cenou.

Je pozoruhodné, že retrotranspozony se zdají být schopny rozšiřovat svou doménu z generace na generaci. LINE a SINE spolupracují na invazi do nových genomových míst prostřednictvím translace jejich DNA na RNA a zpět na čerstvou kopii DNA, která je poté vložena do oblasti genomu bohaté na AT. Tyto čáry a SINE byly dlouho považovány za „nevyžádanou“ DNA, což je absurdní myšlenka, která byla nyní rozptýlena, protože povědomí o jejich kritických funkcích rostlo. Zejména se nyní ukázalo, že mohou také importovat RNA z exogenního zdroje do DNA savčího hostitele. Retrovirálním opakujícím se elementům nalezeným v myším genomu, nazývaným intracisternální A částice (IAP), bylo prokázáno, že jsou schopné inkorporovat virovou RNA do myšího genomu. Rekombinace mezi exogenním neretrovirovým RNA virem a IAP retrotansposonem vedla k reverzní transkripci virové RNA a integraci do genomu hostitele (Geuking et al., 2009).

Kromě toho, jak uvidíme později, mRNA v nových vakcínách proti SARS-CoV-2 by se také mohla předávat z generace na generaci pomocí LINE exprimovaných ve spermatu prostřednictvím neintegrované cDNA zapouzdřené v plazmidech. Důsledky tohoto předvídatelného jevu jsou nejasné, ale potenciálně dalekosáhlé.

 

1. Exogenní a endogenní retroviry

Existuje také obava, že RNA v mRNA vakcínách by mohla být přenesena do lidského genomu s pomocí retrovirů. Retroviry jsou třídou virů, které si uchovávají svou genomickou informaci ve formě RNA, ale které mají enzymy potřebné k reverzní transkripci jejich RNA do DNA a jejímu vložení do hostitelského genomu. Poté se spoléhají na existující přirozené nástroje od hostitele, aby produkovaly kopie viru prostřednictvím translace DNA zpět do RNA a produkovaly proteiny, které virová RNA kóduje, a sestavují je do čerstvé virové částice (Lesbats et al., 2016). .

Lidské endogenní retroviry (HERV) jsou benigní úseky v DNA lidí, které se velmi podobají retrovirům a o kterých se předpokládá, že se staly trvalými sekvencemi v lidském genomu procesem integrace z toho, co bylo původně exogenním retrovirem. Endogenní retroviry jsou hojné u všech čelistnatých obratlovců a odhaduje se, že zabírají 5-8 % lidského genomu. Protein syncytin, který se stal nezbytným pro fúzi placenty se stěnou dělohy a pro krok fúze mezi spermií a vajíčkem při oplodnění, je dobrým příkladem endogenního retrovirového proteinu. Syncytin je obalový gen nedávno identifikovaného lidského endogenního defektního retroviru, HERV-W (Mi et al., 2000). Během těhotenství plod exprimuje vysoké hladiny jiného endogenního retroviru, HERV-R, a zdá se, že chrání plod před imunitním útokem ze strany matky (Luganini a Gribaudo, 2020). Endogenní retrovirové elementy se velmi podobají retrotranspozonům. Jejich reverzní transkriptáza, když je exprimována, má teoretickou schopnost převést spike protein RNA z mRNA vakcín na DNA.

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 415

 

2. Permanentní DNA integrace exogenních retrovirových genů

Lidé jsou kolonizováni velkou sbírkou exogenních retrovirů, které v mnoha případech nezpůsobují hostiteli žádné poškození a mohou být dokonce symbiotické (Luganini a Gribaudo, 2020). Exogenní viry mohou být laboratorně přeměněny na endogenní viry (trvale inkorporované do hostitelské DNA), jak prokázal Rudolf Jaenisch (Jaenisch, 1976), který infikoval preimplantační myší embrya virem myší leukémie Moloney (M-MuLV). U myší generovaných z těchto infikovaných embryí se vyvinula leukémie a virová DNA byla integrována do jejich zárodečné linie a přenesena na jejich potomky. Kromě inkorporace virové DNA do hostitelského genomu se také již v roce 1980 ukázalo, že DNA plazmidy mohou být mikroinjektovány do jader myších embryí za vzniku transgenních myší, které se chovají jako pravé (Gordon et al., 1980). Plazmidová DNA byla začleněna do jaderného genomu myší existujícími přirozenými procesy, čímž byla zachována nově získaná genetická informace v genomu potomka. Tento objev byl od té doby základem mnoha experimentů genetického inženýrství na transgenních myších upravených tak, aby exprimovaly nově získané lidské geny (Bouabe a Okkenhaug, 2013).

3. LINE-1 je široce exprimován

Samotné LINE tvoří přes 20 % lidského genomu. Nejběžnější LINE je LINE-1, která kóduje reverzní transkriptázu, která reguluje základní biologické procesy. LINE-1 je exprimována v mnoha typech buněk, ale ve zvláště vysokých hladinách ve spermatu. Spermie mohou být použity jako vektory jak molekul exogenní DNA, tak molekul exogenní RNA prostřednictvím testů přenosu genů zprostředkovaných spermiemi. Spermie mohou reverzní transkripci exogenní RNA přímo do cDNA a mohou doručit plazmidy sbalení této cDNA do oplodněného vajíčka. Tyto plazmidy jsou schopny se množit ve vyvíjejícím se embryu a osídlovat mnoho tkání plodu. Ve skutečnosti přežívají do dospělosti jako extrachromozomální struktury a mohou být přeneseny na potomstvo. Tyto plazmidy jsou transkripčně kompetentní, což znamená, že mohou být použity k syntéze proteinů kódovaných DNA, kterou obsahují (Pittoggi et al., 2006).

Kromě spermií exprimují reverzní transkriptázu před implantací také embrya a její inhibice způsobuje zástavu vývoje. LINE-1 je také exprimován rakovinnými buňkami a umlčení lidského LINE-1 zprostředkované RNA interferencí indukuje diferenciaci v mnoha rakovinných buněčných liniích. Mechanismus reverzní transkriptázy se podílí na genezi nové genetické informace, a to jak v rakovinných buňkách, tak v zárodečných buňkách. Bylo zjištěno, že mnoho nádorových tkání exprimuje vysoké hladiny LINE-1 a ve svém jádře obsahují mnoho extrachromozomálních plazmidů. Maligní gliomy jsou primárními nádory centrálního nervového systému. Experimentálně bylo prokázáno, že tyto nádory uvolňují exozomy obsahující DNA, RNA a proteiny, které končí v obecném oběhu (Vaidya a Sugaya, 2020). LINE-1 je také vysoce exprimován v imunitních buňkách u několika autoimunitních onemocnění, jako je systémový lupus erythematodes, Sjögrens a psoriáza (Zhang et al., 2020).

4. Integrace genu Spike Protein do lidského genomu

Je pozoruhodné, že bylo prokázáno, že neurony z mozku pacientů s Alzheimerovou chorobou obsahují více variant genu pro amyloidový prekurzorový protein APP, začleněný do genomu, které jsou vytvořeny prostřednictvím procesu zvaného somatická genová rekombinace (SGR) (Kaeser et al., 2020). SGR vyžaduje genovou transkripci, zlomy DNA a aktivitu reverzní transkriptázy, které 

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 416

 

mohou být podporovány dobře známými rizikovými faktory Alzheimerovy choroby. DNA kódující APP je reverzně transkribována do RNA a poté transkribována zpět do DNA a inkorporována do genomu v místě zlomu vlákna. Protože RNA je náchylnější k mutacím, DNA v těchto mozaikových kopiích obsahuje mnoho mutantních variant genu, takže se buňka stává mozaikou, schopnou produkovat více variant APP. Neurony pacientů s Alzheimerovou chorobou obsahovaly ve svých chromozomech až 500 milionů párů bází přebytečné DNA (Bushman et al., 2015).

Výzkumníci z MIT a Harvardu publikovali v roce 2021 znepokojivý dokument, kde poskytli silný důkaz, že RNA SARS-CoV-2 může být reverzně transkribována do DNA a integrována do lidské DNA (Zhang et al., 2021). Byli vedeni k prozkoumání této myšlenky poté, co si všimli, že mnoho pacientů je nadále pozitivních na COVID-19 poté, co byl virus z jejich těla odstraněn. Autoři našli chimérické transkripty, které obsahovaly sekvence virové DNA fúzované se sekvencemi buněčné DNA u pacientů, kteří se zotavili z COVID-19. Vzhledem k tomu, že COVID-19 v závažných případech často vyvolává bouři cytokinů, potvrdili možnost zvýšené aktivity reverzní transkriptázy prostřednictvím studie in vitro s použitím kondicionovaných médií obsahujících cytokiny v buněčných kulturách. Zjistili 2-3násobnou upregulaci endogenní exprese LINE-1 v reakci na cytokiny. Exogenní RNA z viru začleněná do lidské DNA by mohla produkovat fragmenty virových proteinů donekonečna poté, co byla infekce odstraněna, a to vede k falešně pozitivnímu testu PCR.

 

5. Bovinní virový průjem: rušivý model

Bovinní virový průjem (BVD) je infekční virové onemocnění, které postihuje skot po celém světě. Je členem třídy pestivirů, což jsou malé, sférické, jednovláknové, obalené RNA viry. Onemocnění je spojeno s gastrointestinálními, respiračními a reprodukčními chorobami. Jedinečnou vlastností BVD je, že virus může procházet placentou infikované březí samice. To může vést k narození tele, které nese intracelulární virové částice, které považuje za „já“. Jeho imunitní systém odmítá rozpoznat virus jako cizí invazi a v důsledku toho tele vylučuje virus ve velkém množství během svého života a potenciálně infikuje celé stádo. Stalo se rozšířenou praxí identifikovat taková přenašečská telata a vyřazovat je ze stáda ve snaze omezit infekci (Khodakaram-Tafti & Farjanikish, 2017).

Zdá se pravděpodobné, že v budoucnu může nastat nebezpečná situace, kdy žena dostane mRNA vakcínu proti SARS-CoV-2 a krátce poté počne dítě. Spermie by mohly volně přijímat lipozomy vložené do RNA z vakcíny a převádět je na DNA pomocí LINE-1. Pak by produkovaly plazmidy obsahující kód pro spike protein, který by byl pohlcen oplodněným vajíčkem prostřednictvím procesu popsaného výše. Dítě, které se narodí, pak není potenciálně schopno vytvořit protilátky proti spike proteinu, protože jeho imunitní systém ho považuje za „já“. Pokud by se dítě nakazilo SARS-CoV-2 kdykoli během svého života, jeho imunitní systém by se proti viru nebránil a virus by se pravděpodobně mohl volně množit v těle dítěte bez omezení. Z kojence by se v takové situaci logicky stal superrozhazovač. Je pravda, že jde v tuto chvíli o spekulace, ale z toho, co víme o retrotranspozonech, spermatu, oplodnění, imunitním systému a virech, existují důkazy, že takový scénář nelze vyloučit. V experimentech na myších již bylo prokázáno, že genetické prvky ve vektorových vakcínách DNA, které jsou v podstatě plazmidy, se mohou integrovat do genomu hostitele

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 417

 

(Wang et al., 2004). Ve skutečnosti byl takový proces navržen jako základ pro lamarckovskou evoluci definovanou jako dědičnost získaných vlastností (Steele, 1980).

Uvědomění si, že to, co se dříve nazývalo „junk DNA“, není nevyžádaná, je pouze jedním z výsledků nového filozofického paradigmatu v lidském jazyce, biologii a genetice, které je založeno na fraktální genomice (Pellionisz, 2012) – paradigmatu, které Pellionisz spojil se zapojením „pravdivých narativních reprezentací“ (TNR; Oller, 2010), realizovaných jako „iterace fraktální šablony“ do vysoce opakujících se procesů normálního vývoje mnoha větvících se struktur lidského těla. Tyto procesy jsou četné v plicích, ledvinách, žilách a tepnách a především v mozku. mRNA vakcíny jsou experimentální genovou terapií s potenciálem začlenit kód pro spike protein SARS-CoV-2 do lidské DNA. Tento kód DNA by mohl instruovat syntézu velkého počtu kopií proteinových infekčních částic, a to má potenciál vložit do rozvíjejícího se příběhu mnoho falešných signálů, což má za následek nepředvídatelné výsledky.

 

Závěr

Experimentální mRNA vakcíny byly ohlašovány jako mající potenciál pro velké výhody, ale také skrývají možnost potenciálně tragických a dokonce katastrofických nepředvídaných důsledků. mRNA vakcíny proti SARS-CoV-2 byly implementovány s velkou pompou, ale existuje mnoho aspektů jejich širokého využití, které si zaslouží znepokojení. Přezkoumali jsme zde některé, ale ne všechny, z těchto obav a chceme zdůraznit, že tyto obavy jsou potenciálně vážné a nemusí být patrné po celá léta nebo dokonce transgeneračně. Aby se adekvátně vyloučily nepříznivé možnosti popsané v tomto dokumentu, doporučujeme, aby byly přijaty minimálně následující postupy výzkumu a sledování:

• Národní snaha shromáždit podrobné údaje o nežádoucích účincích spojených s vakcínami mRNA s bohatým přidělením finančních prostředků, sledovaná i po několika prvních týdnech po očkování.

• Opakované testování autoprotilátek u populace příjemců vakcíny. Testované autoprotilátky by mohly být standardizovány a měly by být založeny na dříve zdokumentovaných protilátkách a autoprotilátkách potenciálně vyvolaných spike proteinem. Patří sem autoprotilátky proti fosfolipidům, kolagenu, aktinu, tyreoperoxidáze (TPO), myelinovému bazickému proteinu, tkáňové transglutamináze a možná i dalším.

• Imunologické profilování související s rovnováhou cytokinů a souvisejícími biologickými účinky. Testy by měly zahrnovat minimálně IL-6, INF-α, D-dimer, fibrinogen a C-reaktivní protein.

• Studie porovnávající populace, které byly očkovány vakcínami mRNA, a ty, které neměly potvrdit očekávaný snížený výskyt infekcí a mírnější příznaky u očkované skupiny, a zároveň porovnávající výskyt různých autoimunitních onemocnění a prionových onemocnění u stejných dvou populace.

• Studie, které posoudí, zda je možné, aby neočkovaná osoba získala formy spike proteinů specifické pro vakcínu od očkované osoby v těsné blízkosti.

• Studie in vitro k posouzení, zda mohou být nanočástice mRNA absorbovány spermiemi a přeměněny na plazmidy cDNA.

 

International Journal of Vaccine Theory, Practice, and Research 2 (1), 10. května 2021 Strana | 418

 

 

• Studie na zvířatech s cílem určit, zda vakcinace krátce před početím může vést k tomu, že potomci nesou ve svých tkáních plazmidy kódující spike-protein, případně integrované do jejich genomu.

• In vitro studie zaměřené na lepší pochopení toxicity spike proteinu pro mozek, srdce, varlata atd.

Veřejná politika kolem hromadného očkování obecně vycházela z předpokladu, že poměr rizika a přínosu pro nové mRNA vakcíny je „slam dunk“. S masivní očkovací kampaní, která již probíhá v reakci na vyhlášený mezinárodní stav nouze COVID-19, jsme se vrhli do experimentů s vakcínami v celosvětovém měřítku. Přinejmenším bychom měli využít data, která jsou k dispozici z těchto experimentů, abychom se dozvěděli více o této nové a dříve netestované technologii. A v budoucnu vyzýváme vlády, aby tváří v tvář novým biotechnologiím postupovaly opatrněji.

Konečně, jako zřejmý, ale tragicky ignorovaný návrh, by vláda měla také povzbuzovat obyvatelstvo, aby přijalo bezpečné a dostupné kroky k přirozenému posílení imunitního systému, jako je pobyt na slunci, aby se zvýšila hladina vitaminu D (Ali, 2020) a jíst hlavně organické celé potraviny spíše než chemicky nabité zpracované potraviny (Rico-Campà et al., 2019). Rovněž je třeba podporovat konzumaci potravin, které jsou dobrými zdroji vitamínu A, vitamínu C a vitamínu K2, protože nedostatek těchto vitamínů je spojen se špatnými výsledky COVID-19 (Goddek, 2020; Sarohan, 2020).

 

Poděkování

Tento výzkum byl částečně financován společností Quanta Computers, Inc., Taiwan, pod záštitou projektu Qmulus.

 

Konkurenční zájmy

Autoři nemají žádné konkurenční zájmy nebo konflikty, které by mohli deklarovat.

 

Reference

Viz původní dokument

Zobrazeno 547×

Komentáře

Zobrazit 1 komentář »

Pro přidání komentáře se musíš přihlásit nebo registrovat na signály.cz.

Štítky

Autor blogu Grafická šablona signály.cz